DNA遗传信息的“信使”是谁?
1955年,Brachet用洋葱根尖和阿米巴原虫做实验,发现如果加入核糖核酸酶分解细胞内的RNA,蛋白质的合成就会停止。如果加入从酵母中提取的RNA,会再次合成一定量的蛋白质。这表明蛋白质的合成与RNA直接相关。同年,Golstein和Plaut用放射性同位素标记了变形虫细胞核中的RNA,然后标记的RNA陆续从细胞核进入细胞质。所以把DNA的遗传信息从细胞核带到细胞质中来控制蛋白质合成的性状,很可能就是核糖核酸链RNA。
1948报道过,噬菌体感染细菌后,会产生一种非常不稳定的RNA,大部分与核糖体相连,核糖体是细胞器。这个报告引起了S·布纳、雅各布(P·A·雅各布)和梅塞尔森的注意。他们用放射性同位素13C和15N标记噬菌体感染前的蛋白质,用32P标记感染后形成的RNA,证明噬菌体感染后确实形成了一种新的RNA,后者通常与核糖体结合。同时,他们还证明了这种RNA作为噬菌体DNA的信使,命令细菌的核糖体为噬菌体制造外壳蛋白。因此,我们可以得出以下结论:噬菌体的DNA是通过将信使RNA大米“驻扎”到核糖体上来定向蛋白质合成的。于是,在1961中,他们宣布发现了一种新形式的RNA,即充当信使的RNA——mRNA在英语中被称为“messangerRNA”。
信使mRNA从何而来?它是在RNA聚合酶的作用下,遵循碱基互补配对的原理,即G/G和A/U的规则,从51侧到31侧合成的多核苷酸链,这个过程称为转录。显然,转录后,DNA模板上的信息被“转录”成mRNA。mRNA的合成发生在细胞核内,然后通过核膜游入细胞质,指导蛋白质的合成。历史上有很多证明转录现象的实验,其中两个是酶促合成RNA和DNA—RNA杂交最著名的实验。
1961年,P A Weiss和Hurwitz发现了一种可以在DNA模板上合成RNA的酶,这种酶被称为依赖DNA的RNA聚合酶,简称RNA聚合酶。这种酶几乎存在于所有细胞中。它的许多特性与DNA聚合酶相似。它需要高能化合物,即四种核糖核苷酸三磷酸(ATP、UTP、GTP和CTP)来提供能量。以少量DNA为模板,然后加入四个脱氧核苷酸。结果,可以合成与一条DNA链互补的RNA分子。而且除了DNA模板中尿嘧啶U代表胸腺嘧啶T外,RNA的碱基比例始终与双链DNA模板相同。当单链DNA之一用作转录模板时,产物RNA的碱基比例与单链DNA的碱基比例互补。酶促合成RNA的实验证明,RNA的合成是以DNA为模板,根据碱基互补配对的原理进行转录的。
DNA根据碱基互补配对原理转录RNA的另一个令人信服的证据来自DNA—RNA杂交实验。正如我们所知,两条DNA链通过互补碱基之间的氢键结合在一起。如果把DNA慢慢加热到100℃,碱基之间的氢键就会断裂,把两条链分开,这叫做变性或熔解。如果它们被缓慢冷却,两条分开的互补链会由于氢键而重新结合成双链,这被称为退火或复性。在转录过程中,RNA根据碱基互补原理与DNA链混合,因此不仅会发生两条DNA链之间的退火,而且一条DNA链与RNA、RNA的杂交试验是检查DNA与RNA对应关系的直观有效的方法。1961年,霍尔和Spi german用这种技术证实了DNA的转录。
无论哪种RNA都是以DNA为模板转录得到的。不仅是作为信使的mRNA,还有构成核糖体的rRNA和tRNA。