荧光探针的分类检测

目前常用的荧光探针有荧光素探针、无机离子荧光探针、荧光量子点、分子信标等。除了核酸和蛋白质的定量分析,荧光探针还广泛用于核酸染色、DNA电泳、核酸分子杂交、定量PCR技术和DNA测序。

目前检测荧光探针的方法主要有单点测量和电荷耦合器件(CCD)荧光成像(包括用于微区分析的激光聚焦荧光显微镜成像)。由于光电倍增管扫描时间长,激光照射强度大,很难掌握荧光的早期变化。而CCD荧光成像阵列大,成像视场宽,成像时间可调,检测效果更好。

化学发光检测具有设备简单、操作简便、分析速度快、灵敏度高等特点。化学发光成像分析是化学发光和成像技术的结合,具有分辨率高、可同时检测多个样品、光谱响应范围宽、灵敏度高等特点[10,11],已广泛应用于凝胶、蛋白质印迹和微阵列芯片中化学发光信号的检测。在这个实验中,TCPO?咪唑?H2O2?荧光探针化学发光成像系统。由于化学发光不需要任何光源,荧光成像时不存在荧光检测的干扰或不可避免的光学背景,因此可以获得较低的检测限。利用该系统对五种荧光探针进行了定量分析,并对四甲基罗丹明异硫氰酸酯(TRITC)标记的单克隆羊抗人IgG的化学发光成像进行了研究。检出限为10-11 mol/L,比同等条件下荧光成像低一个数量级。