细辛脑的主要制剂及其发展和起源？
1仪器及试剂HP 1100高效液相色谱仪；α-细辛脑对照品(中国药品生物制品检定所，批号:10298-0001)；β-细辛脑对照品(美国Sigema公司)；α-细辛脑原料(湖北天门天一制药有限公司，批号；20040501, 20040502,20040601);注射用细辛脑(武汉海特生物制药有限公司，规格:8 mg，批号:20040501，20040502，20040601)；细辛脑注射液(湖北天药制药有限公司，规格为2ml；8 mg，批号:20041010，20041011，20041065438)；甲醇(色谱纯度，CAS 67-56-1 TEDIA公司，ING美国)。
2方法和结果
2.1色谱条件
色谱柱:Diamonsil C18柱(200 mm×4.6 mm，5 WM)；流动相:甲醇-水(70:30)；流量为1.0ml min-1；检测波长:258nm；；柱温；25℃。
2.2线性关系和最小检测量
准确称取25mgα-细辛脑对照品，置于100ml容量瓶中，加入流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。准确量取2.0 ml、4.0 ml、6.0 ml、8.0 ml、10.0 ml于25 ml容量瓶中，用流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，进行色谱分析。峰面积A与浓度C(μg·mL-1)呈线性回归，C = 1.38× 10-5a+0.45，r=0.9998。实验结果表明，当α-细辛脑的浓度为20 ~ 100 μ时。在本文色谱条件下，信噪比为3:1时，最小检出量为0.48 ng。
2.3回收率测试
准确称取5个已知含量的同批原料样品，分别加入5mgα-细辛脑对照品，按样品测定项下的方法进行测定，计算回归率。结果见表1。
表1样品回收试验
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测量加入样品中的含量的平均回收率RSD。
(毫克) (毫克) (毫克)(%) (%) (%)
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5.07 5.02 10.11 100.32
5.05 5.02 10.05 99.56
5.02 5.02 10.01 99.40 99.81 0.43
5.03 5.02 10.04 99.82
5.01 5.02 10.03 100.12
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2.4精度测试
取对照溶液，浓度为50.2μg·mL-1，样品体积为20μl，重复测定5次。α-细辛脑的平均色谱峰面积为65438±0027，相对标准偏差为0.6% (n = 5)。
2.5稳定性测试
浓度为50.2μg·mL-1的对照品溶液分别在1、2、4、6、8h进样，进样体积为20μl，峰面积RSD为1.0%，说明α-细辛脑溶液在8h内稳定。
2.6重复性
按照样品测定方法，取5个同批号样品，测定含量，RSD = 0.4% (n = 5)。
2.7样品测定
准确称取(或量取)适量(约相当于25mgα-细辛脑)，置于100 ml容量瓶中，加入流动相适量，充分摇匀使其溶解并稀释至刻度，摇匀，准确量取5 ml，置于25 ml容量瓶中，加入流动相至刻度，摇匀作为供试品溶液；取α-细辛脑约25 mg，置于100ml容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，精密量取5 ml，置于25 ml容量瓶中，加流动相至刻度，摇匀作为对照溶液。根据上述色谱条件，样品体积为20μl，用外标法计算其含量，见表2。色谱图见图1。
表2样品含量测定结果(制剂标示量)
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生产厂家剂型批号该方法为紫外法。
(%) (%)
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湖北省天门天一
制药有限公司α-细辛脑原料20040501 100.2 101.4
20040502 99.9 101.1
20040601 100.3 101.6
武汉海特生物
制药有限公司注射用α-细辛脑20040906100.6101.2
20040908 98.8 100.3
20040910 99.8 101.2
湖北天药大药房
股份公司α-细辛脑注射液20041010 99.5 99.9
20041011 99.1 99.5
20041012 99.2 99.1
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A.α-细辛脑对照品b .样品c .空白对照图1 HPLC色谱图
3讨论
3.1国家药品标准
当地化学品标准提高。国家标准第五卷α-细辛脑采用紫外法测定。原料和制剂分别在波长258 nm和313 nm下测定。该方法波长不均匀，β-细辛脑也在此吸收。这种方法特异性差。用该方法测定，测定结果准确。
3.2测定波长的选择
α-细辛脑用流动相溶解。为了确定合适的检测波长，在200~400 nm进行扫描。在此范围内，α-细辛脑有两个最大吸收波长，分别为258 nm和313 nm。检测样品时，258 nm对杂质检测比较敏感，所以选择258 nm作为检测波长。
3.3流动相的选择
流动相的选择主要是甲醇和乙腈的比较，实验结果如表3所示。
表3流动相比例的选择
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20:80 60:40 70:30 80:20
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甲醇-水在25分钟内没有在18分钟出现峰值，在12分钟和5分钟出现峰值。
峰α β分辨率α β分辨率α β分辨率α β不能分离。
还是开车好。
乙腈-水在25分钟内和22分钟内达到峰值。14分钟在5分钟内达到峰值。
峰α β分辨率α β分辨率α β分辨率α β不能分离。
还是开车好。
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从以上结果可以看出，70:30的比例较好，出峰时间较早，β-细辛脑峰与主峰分离较好。从经济价值来说，甲醇比乙腈便宜，所以流动相是甲醇-水(70:30)。
3.4主要杂质的分离
α-细辛脑中的主要杂质为β-细辛脑、2.4.5-三甲氧基苯和2.4.5-三甲氧基苯丙酮，在该体系中能得到很好的分离，相关物质也能得到很好的分离。