DNA克隆的哪一步最常用PCR？

PCR广泛应用于目的DNA片段的克隆，称为PCR克隆。？聚合酶链反应(PCR)是一种用于扩增特定DNA片段的分子生物学技术，可视为一种特殊的DNA体外复制。PCR最大的特点就是可以大幅度增加少量的DNA。

PCR的作用:

所以，只要能分离出一点点DNA，就可以通过PCR进行扩增和比对，不管是化石，还是历史人物的遗骸，或者是几十年前一起杀人案中凶手留下的头发、皮肤或血迹。这也是“微量证据”的力量。

这个想法最早是由美国的Mullis在1983年提出的，简单的DNA扩增法是Mullis在1985年发明的，这意味着PCR技术的真正诞生。到目前为止，2013，PCR已经发展到第三代技术。65438-0976年，台湾省科学家钱家运发现了稳定的Taq DNA聚合酶，也为PCR技术的发展做出了基础性的贡献。

PCR是基于DNA在体外95℃变性成为单链的事实。在低温下(常为60℃左右)，引物和单链根据碱基互补配对原理结合，然后将温度调节到DNA聚合酶的最适反应温度(约72℃)，DNA聚合酶沿着从磷酸到五糖(5’-3’)的方向合成互补链。

基于聚合酶的PCR仪其实就是一个温控装置，可以很好的控制变性温度、复性温度和延伸温度。